К классу I относятся вирусы, содержащие двухцепочечную ДНК, например, вирус осповакцины м
РНК этих вирусов синтезируется таким же образом, как и клеточные м РНК, геном вируса — двухцепочечная
ДНК — служит матрицей для синтеза м РНК. Класс II включает вирусы, содержащие одноцепочечную ДНК.
Их м РНК по нуклеотидному составу, вероятно, полностью гомологична ДНК вириона. Поэтому м РНК
должны транскрибироваться с «минус» - цепи ДНК, входящей в состав репликативного промежуточного
комплекса-вируса. К остальным классам относятся вирусы, у которых геном служит РНК. Класс III включает
вирусы, содержащие двухцепочечную РНК, например реовирусы. Эта РНК служит мартицей для
асимметричного синтеза вирусных м РНК. Оказалось, что у всех до сих пор обнаруженных вирусов класса III
геном сегментирован, т.е. состоит из множества хромосом, каждая из которых кодирует один полипептид.
Вирусы, относящиеся к классу IV, содержат «плюс» -цепи РНК. Геном этих вирусов имеет ту же полярность,
что и их м РНК. Вирусы данного класса делятся на два подкласса. У вирусов подкласса Ivа, типичным
представителем которых является вирус полиомиелита, все белки синтезируются при трансляции одной-
единственной молекулы м РНК. Образующийся при этом полипротеин расщепления затем
протеолитическими ферментами с образованием функционально активных белков. Все м РНК этих вирусов
имеют ту же длину, что и РНК-геном. Вирусы подкласса Ivв называют также тогавирусами. Они
синтезируют в клетке по меньшей мере два вида вирусных м РНК: м РНК одного вида имеет ту же длину, что
и РНК вириона, а м РНК второго вида представляет собой фрагмент РНК вириона.
Вирусы класса V называют также «минус» — РНК-вирусами. По нуклеотидной последовательности м
РНК этих вирусов комплементарна РНК вирионов. Следовательно, вирион содержит матрицу для синтеза м
РНК, но не для синтеза белков. Различают два подкласса вирусов класса V. Геном вирусов подкласса Vа
представляет собой одну молекулу РНК, с которой транскрибируется целый ряд м РНК, причем все до сих
пор изученные м РНК этих вирусов моноцистронные. Вирусы подкласса Vв имеют сегментированный
геном. Каждый из сегментов генома служит матрицей, с которой транскрибируется лишь один вид молекул м
РНК. Один из этих м РНК кодируют мноцистроенные, а другие — полицистроенные полипротеины.
Вирусы, относящиеся к классу VI, называют также ретровирусами. Это самые необычные из всех известных
РНК-содержащих вирусов, ибо при транскрибировании их РНК синтезируется не РНК, как обычно, а ДНК,
которая в свою очередь служит матрицей для синтеза м РНК. Следовательно м РНК этих вирусов и РНК их
вирионов не отличаются по полярности друг от друга, а некоторые из них идентичны и по длине. Из
удивительных свойств этих генетических систем вытекает не мало замечательных следствий.
Плюс — РНК-вирусы: пикоркавирусы (класс IV а) Вирусы этого подкласса, из которых наиболее
интенсивно изучался вирус полиомиелита, известны под общим названием «пикоркавирусы» . К их числу
относятся также вирус менго, вирус энцефаломиокардита (пикоркавирусы мышей) , риновирусы (вирусы,
вызывающие у человека один из видов острых респираторных заболеваний, — так называемую простуду_ и
вирус ящура.
Тогавирусы (класс IV в) К тогавирусам относятся все плюс — РНК-вирусы, в которых образуются м
РНК двух типов, различающиеся по своим размерам. Название «тогавирусы» отражает особенности внешней
оболочки их вирионов. Синтез этой оболочки рассматривается в другом разделе, а здесь мы обсудим только
механизмы синтеза РНК и белков, используемые вирусами данного класса. Прежде чем перейти к
рассмотрению молекулярной биологии тогавирусов, интересно вспомнить, как были обнаружены вирусы
этой группы. Эпидемиологи установили, что многие вирусы, вызывающие заболевания позвоночных
животных, переносятся клещами или комарами.
Тогавирусы, патогенные для человека, обычно эндемичны для различных видов животных и
передаются человеку лишь через укус какого-либо членистоногого переносчика. Вирусы этой группы были
названы арбовирусами (означает «переносимый членистоногими» ) . Впоследствии, однако, стало ясно, что
под этим названием объединены вирусы, резко различающиеся по своим биохимическим свойствам. Общим
у них обычно является способность размножаться как в клетках насекомого-переносчика, так и в клетках тех
или иных позвоночных животных. Основная часть арбовирусов по своим биохимическим свойствам
относится к тогавирусам. Серологически тогавирусы делятся на две группы (А и В) , которые в настоящее
время называются альфавирусами и флавирусами соответственно. К числу тогавирусов относятся по
меньшей мере два вируса, не являющиеся арбовирусами, — вирус краснухи и вирус, повышающий в крови
зараженного им животного содержание лактатдегидрогеназы..
Вирусы, содержащие минус — цепь РНК (класс V) : вирус везикулярного стоматита Минус — РНК-
вирусы подразделяются на три главные морфологические категории: рабдовирусы, парамиксовирусы и
ортомиксовирусы. В плане биохимической стратегии рабдовирусы и парамиксовирусы очень близки друг к
другу и составляют большую часть хорошо изученных вирусов класса Vа. В данном разделе основное
внимание будет уделено только одному рабдовирусу — вирусу везикулярного стоматита (ВВС) , так как он
изучен наиболее детально. Хотя ВВС и патогенен для крупного рогатого скота, вызываемые им заболевания
протекают легко и не приводят к серьезным экономическим убыткам. В культурах клеток ВВС размножается
быстро и урожай его достигает высоких титров. Зараженные им клетки погибают. При заражении
чувствительных клеток другими рабдовирусами или парамиксивирусами обычо развивается персистентная
инфекция, не приводящая к гибели клеток. Поэтому такие системы вирус-клетка намного труднее поддаются
изучению. Ортомиксовирусы, из которых наиболее известными являются вирусы гриппа человека, имеют
сегментированным геном, состоящий из ряда отдельных минус-цепей РНК.
Вирион ВВС, подобно вирионам всех других тогавирусов, покрыт внешней оболочкой, но в отличие
от них имеет характерную форму пули. Само название «рабдовирусы» происходит от греческого корня,
означающего «палочка» , и обусловлено асимметричностью этих частиц. Пулеобразная форма вириона
отражает форму его нуклеокапсида, предоставляющего собой свернутую в цилиндр спираль и содержащего
одну молекулу РНК с мол. Весом 4. 106. Эта РНК не обладает ни одним из характерных признаков м РНК
вирусов эукариот: на ее 3-м конце нет последовательности poly (А) , а на 5-м конце нет «шапочки» . Кроме
того, она не обладает инфекционностью. Ее функция состоит в том, что она служит мартицей для синтеза
вирусных м РНК и, следовательно, является минус — цепью РНК. Нуклеокапсид ВВС представляет собой
очень стабильную структуру, и находящаяся в нем РНК полностью защищена от действия рибонуклеазы.
Нуклеокапсид этого вируса инфекционен, но его удельная инфекционность очень мала. Вирион ВВС
содержит пять различных белков, и других вирусных белков в зараженных клетках не обнаруживается. Белок,
на долю которого приходится основная масса белков нуклеокапсида и вириона в целом, называется белком
N. Нуклеокапсид содержит небольшое количество еще двух белков, называемых белками L и № 9. Они
принимают участие в синтезе вирусной РНК. Пространство между нуклеокапсидом и липопротеидной
оболочкой вириона заполнено молекулами еще одного вирусного белка, называемого белком М. Наконец,
снаружи от двойного слоя липидов оболочки находится белок G, образующий упорядоченную систему
расположенных на поверхности вириона шипов.
В отличие от рабдовирусов парамиксовирусы не имеют пулеобразной формы, а представляют собой
неправильные сферы, что отражает менее упорядоченную укладку их нуклеокапсидов.
Внешние оболочки вирусов Общим свойством тогавирусов, минус-РНК-вирусов и ретровирусов
является наличие у них липопротеидной внешней оболочки, окружающей рибонуклеопротеидную
сердцевину. Механизм образования такой оболочки у всех вирусов один и тот же: рибонуклеопротеид
связывается с внутренней поверхностью измененного участка плазматической мембраны клетки и при
выходе из клетки окружается этой измененной мембраной. Такой процесс называется почкованием, а
образующаяся вирусная частица в тот период, когда она еще связана с плазматической мембраной, носит
название почки. На электронных микрофотографиях ультратонких срезов клеток эти почки очень хорошо
видны, ибо они представляют собой характерно измененные оболочки плазматической мембраны.
Строение вириона В состав вирионов, имеющих внешнюю оболочку, входят три главных класса
структурных белков: глинопротеиды, белки матрикса и белки нуклеокапсида. Макроструктура вириона
определяется свойствами поверхности двойного слоя липидов, окружающего нуклеокапсид. Наружная
поверхность двойного липидного слоя покрыта гликопротеидом, а внутренняя контактирует с белками
матрикса или нуклеокапсида. Все липиды, содержащиеся во внешней оболочке вириона, имеют клеточное
происхождение, так как не обнаружено какого-либо вирус-специфического обмена липидов. По своему
составу липиды вириона очень сходны с липидами плазматической мембраны клетки-хозяина: в их число
входят холестерин, гликолипиды и фосфолипиды. Клетки различных видов существенно различаются между
собой по липидным компонентам плазматических мембран. Поэтому липидный состав вируса,
формирующегося в данной клетке, точно соответствует липидному составу ее плазматической мембраны.
Гликопротеиды, содержащиеся в оболочках различных вирусов, обладают как специфическими
свойствами, так и свойствами, общими для всех вирусных гликопротеидов. Все они находятся на внешней
поверхности вириона и могут быть удалены под воздействием протеаз. Поскольку протеазы отщепляют от
интактных вирионов только гликопротеиды, ясно, что наружу из двойного слоя липидов выступают лишь
эти молекулы вирусных белков. Следует отметить, что протеазы удаляют лишь часть молекулы
гликопротеида. Другая ее часть — «ножка» , состоящая из высокогидрафобного полипептиада — по-
видимому, погружена в двойной липидный слой и недоступна для протеазы.
Сборка вириона На первой стадии формирования вириона происходит синтез его индивидуальных
белков. Белки каждого из трех классов синтезируются, по-видимому, независимо друг от друга и часто на
отдельных м РНК.
Гликопротеиды образуются на связанных с мембранами м РНК и в свободном состоянии в клетках
никогда не встречаются. Молекулы белка «созревают» по мере их передвижения из шероховатого
эндоплазматического ретикулума в гладкий, а затем, возможно, в аппарат Гольджи и, наконец, в
плазматическую мембрану клетки. Присоединение углеводов к белкам происходит при перемещении
последних по внутриклеточным мембранам. В конце концов они выходят на поверхность клетки, где,
вероятно, свободно плавают в жидком двойном липидном слое плазматической мембраны.
Вирусы, содержащие двухцепочечную РНК (класс III) Вирусы данного класса были обнаружены у
плесеней, высший растений, насекомых и позвоночных животных. Ни один из этих вирусов не содержит
липидов. Их капсиды состоят из двух слоев — внутреннего (сердцевины) и наружного, образующего
оболочку вокруг сердцевины. В сердцевине находится множество сегментов двухцепочечной РНК и
варьирующее число небольших олигонуклеотидов, не имеющих, по-видимому, никаких генетических
функций. Наиболее тщательно изучены реовирусы человека, которые, как правило, не вызывают каких-либо
явных патологических симптомов. Исключение составляют, по-видимому, реовирусоподобные агенты,
выделяемые при гастроэнтеритах у детей. Тем не менее эти вирусы часто выделяют из организма человека,
причем в лабораторных условиях они хорошо размножаются. Некоторые данные получены также об
отдельных вирусах растений и насекомых, содержащих двухцепочечную РНК.
Размножение вирусов животных ДНК-содержащие вирусы и ретровирусы Поскольку в нормальных
клетках нет никаких эквивалентов генетических систем РНК-содержащих вирусов, такие вирусы способны
размножаться лишь в том случае, если они синтезируют ферменты, необходимые для транскрипции и
репликации их генома. В случае ДНК-содержащих вирусов, напротив, синтез их м РНК происходит так же,
как и м РНК нормальных клеток. Репликация их генома и генома клетки формально также весьма сходны.
Более того, транскрипция и репликация ДНК большинства вирусов, так же как и клеточной ДНК происходит
в ядре. Сходство основных процессов у клеток и ДНК-вирусов наводит на мысль, что для размножения
последних нет никакой необходимости в индукции каких-то особых ферментов, отсутствующих в
незараженной клетке. Отсюда следует, что для размножения ДНК-вируса достаточно присутствия белков его
капсида, так что геном такого вируса вполне может состоять только из генов, кодирующих его капсид.
Следует, однако, подчеркнуть, что, хотя такие простые ДНК-вирусы действительно существуют, жизненный
цикл большинства ДНК-вирусов значительно сложнее. Различные ДНК-вирусы очень сильно отличаются
друг от друга как по величине, так и по сложности их строения. Молекулярный вес ДНК наименьших из них
составляет всего 1,5х106 дальтон, а самых крупных — в 100 раз больше. По мере увеличения вирусных
геномов они становятся все сложнее и сложнее. Возрастает общее число генов и усложняется механизм
репликации ДНК.
Поскольку мелкие ДНК-вирусы способны к интенсивному размножению, представляется
удивительным сам факт возникновения крупных ДНК-вирусов. Одно из преимуществ, которое может
получить вирус при увеличении его генома — это уменьшение зависимости от клетки.
Парвовирусы Самыми простыми из всех известных вирусов, вероятно, являются парвовирусы. Их
геном представлен одноцепочечной ДНК с мол. Весом всего 1,5х106 дальтон. Однако для единственного
кодируемого этим вирусом продукта — белка его капсида — даже эта малая молекула слишком велика.
Размножение этого крошечного паразита, по-видимому, действительно полностью зависит от
соответствующих систем клетки-хозяина. Существует два основных класса парвовирусов — автономные и
дефектные. Все до сих пор известные автономные парвовирусы — это вирусы грызунов; для транскрипции,
репликации и других функций эти вирусы используют соответствующие ферменты клетки-хозяина.
Дефектные парвовирусы размножаются лишь в клетках, которые заражены одновременно аденовирусом,
выполняющим некоторые необходимые функции. До сих пор не найдено нормальных клеток, в которых
могли бы размножаться дефектные парвовирусы. В клетках, находящихся в стационарной фазе, автономные
парвовирусы не размножаются, они размножаются лишь в клетках ДНК которых уже реплицируется, т.е. в
клетках, находящихся в S-фазе клеточного цикла.
Это ограничение касается типа клеток, поражаемых данными вирусами. Парвовирусы вызывают
аномалии развития у эмбрионов и дефекты растущих тканей у новорожденных. Они вызывают также
нарушения функции кишечника, что, вероятно, является следствием их размножения в быстро делящихся
клетках крипт.
Дефектные парвовирусы размножаются только в клетках, зараженных аденовирусом — помощником,
и не зависят от фазы клеточного цикла. Их вирусом- помощником могут быть только аденовирусы.
Герпесвирусы также способны выполнять некоторые из необходимых функций вируса — помощника, однако
полные инфекционные частицы парвовирусов в этом случае не образуются. Именно по этой причине
дефектные парвовирусы называют также «аденоассоциированными» вирусами (ААВ) .
Одно из характерных различий между автономными и дефектными парвовирусами состоит в том, что
геном первых представлен уникальной одиночной цепью ДНК, а геном дефектных парвовирусов —
эквимолярными количествами одноцепочечных комплелянтарных друг другу молекул ДНК. При
гибридизации одноцепочечные молекулы ДНК, выделенные из вирионов ААВ, легко превращаются в
молекулы двухцепочечных ДНК. Вирионы парвовирусов близки по величине к рибососмам — их диаметр 20
нм. Не содержащие липидов капсиды этих вирусов состоят из трех полипептидов различной длины.
Молекулярный вес самого большого из них 90000 дальтон. Судя по пептидной карте, малые полипептиды
представляют собой части большого; поэтому полагают, что вирусная м РНК кодирует только полипептид с
мол. весом 90000.
Паповавирусы Паповавирусы известны лучше других благодаря принадлежащим к этой группе
подробно исследованным онкогенным вирусам — вирусу полиомы и SV40, которые размножаются лишь в
очень узком кругу клеток млекопитающих. Обычно при изучении онкогенных свойств этих вирусов, имеется
в виду их способность трансформировать клетки in vitro — ими заражают клетки тех видов, которые они
трансформируют, но в которых не размножаются, а следовательно, и не вызывают их лизис.
В состав группы паповавирусов, кроме вирусов полиомы и SV40, входит ряд других вирусов. Свое
наименование паповавирусы — группа получила от названий трех вирусов: вируса кроличьей папилломы,
вируса полиомы (по) и вакуолизирующего (ва) обезъянеьего вируса, тип 40 (SV40) . У человека эти вирусы не
вызывают заболеваний, хотя SV40 иногда заражает клетки человека. У людей широко распространены три
других паповавируса — вирус JC, ВК и вирус бородавок. Предполагается, что вирус JC является
этиологическим агентом прогрессирующего дегенеративного заболевания центральной нервной системы
человека. Вирус ВК часто обнаруживают в моче лиц, принимавших иммунадепрессанты, однако пока его не
связывают с какой-либо патологией у человека. Вирус бородавок человека, как и вирусы папиллом
животных, вызывает лишь доброкачественную пролиферацию эпидермиса.
Вирусы паполломы плохо размножаются в клеточных культурах, поэтому до сих пор изучены в
основном, лишь их физические свойства. Установлено, что их ДНК несколько крупнее, чем ДНК вирусов
SV40 и полиомы.
Аденовирусы Хотя в вирионах аденовирусов содержится в 608 раз больше ДНК, чем в
паповавирусах, и геном аденовирусов кодирует соответственно большее число белков, циклы репродукции
этих вирусов в основном сходны. Так, у аденовирусов, как и у паповавирусов, имеется механизм,
контролирующий переключение синтеза ранних макромолекул на синтез поздних, а их м РНК. Также
считываются с обеих цепей вирусной ДНК. Однако ДНК аденовирусов — линейная молекула, и поэтому
механизм ее репликации должен отличаться от механизма репликации ДНК паповавирусов. В отличие от
ДНК паповавирусов частота рекомбинации ДНК аденовирусов достаточно велика, благодаря чему
последние можно изучать и методами формальной генетики.
Разнообразие аденовирусов Аденовирусы выделены от самых разнообразных видов животных. Более
того, от каждого из этих видов выделено много различных аденовирусов. Так, среди аденовирусов человека
идентифицирован 31 серологический тип. Однако в молекулярно-биологическом аспекте аденовирусы
весьма сходны, поэтому при дальнейшем обсуждении мы не будем проводить между ними различий.
Аденовирусы в основном вызывают острые респираторные заболевания; некоторые серотипы аденовирусов
человека при введении хомячкам вызывают у них опухоли. Почти все штаммы аденовирусов способны
вызывать трансформацию фибробластов крысы в культуре, но ни один из этих вирусов не имеет отношения к
злокачественным опухолям у человека. Из сказанного ясно, что аденовирусы представляют интерес и как
инфекционные агенты, вызывающие респираторные заболевания у человека, и как вирусы, способные
вызывать опухоли, и как объекты молекулярно-биологических исследований.
Вирионы аденовирусов отличаются изяществом структуры. В синтезе вирусных частиц участвуют 14
видов белков, а быть может, и больше. В это число входят и белки, из которых построены компоненты
поверхности вириона — гексоны, пентоны и фибриллы.
Герпесвирусы Герпесивирусы, столь различные по характеру репродукции, но весьма сходные
морфологически и по содержанию ДНК, составляют часть биохимически гомогенной группы. Наиболее
детально изучены герпесвирусы, вызывающие лизис зараженных клеток. К их числу относятся вирусы
простого герпеса, типы 1 и 2 и ряд быстро размножающихся герпесвирусов животных. Из вирусов этой
группы, не вызывающих лизиса, наиболее изучен вирус Эпштейна-Барр, вызывающий инфекционный
мононуклеоз — этот вирус постоянно выделяют из клеток двух видов опухолей человека — лимфомы
Беркитта и карциномы носоглотки. В отличие от вирусов простого герпеса типов 1 и 2, размножающихся в
культурах многих клеток и вызывающих лизис, вирус Эпштейна-Барр заражает только В-лимфоциты
приматов и размножается не во всех из них.
ДНК герпесвирусов кодирует не менее 49 различных белков, для синтеза которых используется почти
вся кодирующая способность вирусного генома. Изучение физиологии столь сложной системы — задача
далеко не легкая.
Поксвирусы У всех ДНК-содержащих вирусов, о которых речь шла выше, ДНК синтезируется в ядре
зараженной клетки, там же и созревают их вирионы. Все стадии размножения поксвирусов происходят
только в цитоплазме. Следовательно, репродукция поксвирусов происходит в совершенно иных условиях по
сравнению с «ядерными» ДНК-содержащими вирусами. Известно большое разнообразие поксвирусов.
Наиболее важным из них для человека является вирус натуральной оспы. Однако наиболее детально изучен
вирус осповакцины и родственные ему вирусы кроличьей оспы и коровьей оспы. Все поксвирусы имеют
общий антиген.
Автономность размножения поксвирусов Электронная микроскопия зараженных клеток показывает,
что процесс размножения поксвирусов ограничен цитоплазмой. Наиболее убедительно об этом
свидетельствует тот факт, что почти весь цикл размножения вирусов этой группы может реализоваться в
клетках, которые в результате воздействия на них цитохалазина В лишены ядра. Заражение таких фрагментов
приводит к синтезу в них вирусной ДНК и многих вирусных белков: вирионы же в безъядерных клетках не
синтезируются. Следовательно, поксвирусы переносят центр функциональной активности клетки из ядра в
цитоплазму. Можно ожидать, что для этого вирус должен обладать обширной специфической информацией,
и поксвирусы действительно такой информацией обладают, что выражается в числе кодируемых и
синтезируемых ими белков. В полном соответствии с этим является то, что молекулярный вес ДНК таких
вирусов больше, чем у любого другого вируса животных, и что репродукция данного вируса связана с
инициацией активности самых разнообразных ферментов. Размножаясь в цитоплазме, поксвирусы во
многом ближе к РНК-вирусам, чем к «ядерным» ДНК-вирусам. И действительно, подобно некоторым РНК-
вирусам, размножение поксвирусов как таковое начинается с транскрипции ДНК вириона РНК-
полимеразой, содержащейся в самом вирионе, вирион содержит все ферменты, необходимые для
превращения РНК-предшественника в функционально активные м РНК.
Ретровирусы Ретровирусы обладают свойствами как РНК, так и ДНК-содержащих вирусов. В
вирионе ретровирусов содержится РНК, однако внутри клетки они существуют в виде ДНК,
интегрированной с геномом клетки-хозяина. По существу, РНК этих вирусов, проникая в клетку,
превращается в ее гены, которые могут передаваться потомкам в виде стабильных интегрированных молекул
ДНК. ДНК-вирусов, которые наследовались бы подобным образом, не обнаружено, так как все ДНК-
содержащие вирусы вызывают продуктивную инфекцию и убивают клетки, в которых они размножаются.
Включаться в геном клетки-хозяина ДНК-содержащие вирусы могут только в случаях «непродуктивных»
вирусных инфекций. Ретровирусы, напротив, размножаясь путем почкования, подобно многим другим РНК-
вирусам, поддерживают продуктивную инфекцию, не вызывая гибели клетки-хозяина. Из сказанного ясно,
что центральная проблема, без решения которой нельзя понять механизм репродукции этих вирусов, состоит
в том, каким образом они превращаются из РНК-вирусов в ДНК-гены; этот процесс был назван обратной
транскрипцией, ибо здесь направление потока биологической информации изменено на обратное.
Обнаружено много самых разнообразных ретровирусов. Некоторые из них способны вызывать
злокачественные опухоли. Лучше других изучены вирус саркомы Рауса и вирусы, вызывающие лейкозы у кур
и мышей. Из всех известных РНК-содержащих вирусов злокачественные опухоли могут вызвать только
ретровирусы. Именно поэтому их принято называть общим термином «опухолеродные РНК-вирусы» , хотя
многие ретровирусы не вызывают ни злокачественных, ни каких-либо иных клинически выраженных
заболеваний. Поэтому в единую классификационную группу их объединяет лишь способ репродукции.
Подобно другим группа вирусов, различные виды ретровирусов также отличаются друг от друга по размеру и
морфологическим особенностям вирионов, числу белков, а также по кругу чувствительных хозяев.
Влияние вирусной инфекции на клеточном уровне Различают три вида воздействий, оказываемых
вирусами животных на клетки. Легче всего выявляется деструктивный, или цитолитический, эффект, для
которого характерно обширное повреждение множества различных клеточных органелл. Вероятно, вирус —
специфические макромолекулы вызывают первичное повреждение, влекущее за собой цепь вторичных
деструктивных процессов, в которых участвуют уже продукты метаболизма самой клетки. На другом конце
спектра возможных последствий находится явление трансформации, когда зараженная вирусом клетка
приобретает способность к неограниченному делению. По-видимому, это результат устойчивой интеграции
вирусного генома или его части с геномом клетки, которая не приводит к ее гибели. Трансформированная
клетка часто выходит из-под контроля механизмов, регулирующих клеточное деление. Действие некоторых
вирусов, геном которых не включается в хромосомы клеток, занимает промежуточное положение между
резко выраженным деструктивным эффектом и трансформирующим действием. В этих случаях зараженные
клетки еще некоторое время функционируют и по меньшей мере в одном случае — при заражении
парамиксовирусами — продолжают расти и делиться, одновременно продуцируя вирус («персистентная
инфекция» ) . Возможна еще одна категория реакции клеток, при которой можно говорить об индуктивном
действии вируса. Многие вирусы способны индуцировать образование в зараженной клетке белков,
кодируемых не вирусным, а клеточным геномом, но, по-видимому, синтезируемых клетками в ответ на
вирусную инфекцию. Этот тип реакции не обязательно связан с тем или иным конечным результатом
взаимодействия вируса с клеткой.
Цитолическое действие вирусов: биохимические данные Зная, что многие вирусы вызывают резкие
деструктивные изменения клеток-хозяев, биохимики заинтересовались вопросом, прекращается ли при этом
синтез всех клеточных белков РНК и ДНК, и если да, то в какой последовательности. Ответы сводятся к
следующему: 1. Вероятно, различные вирусы подавляют синтез клеточных белков, используя разные
механизмы. Степень и время этого подавления тоже неодинаковы.
2. Нередко вирус блокирует накопление клеточной РНК, приостанавливая процессинг пре-р РНК, но
никак не влияя на ее синтез. Образование клеточной т РНК часто не снижается. Во многих случаях бывает
нарушен синтез клеточных м РНК, но механизм этого нарушения совершенно неясен.
3. Нередко бывает подавлена инициация синтеза клеточной ДНК, однако при некоторых вирусных
инфекциях клетки, уже вошедшие в фазу S, могут завершить цикл синтеза ДНК, а клетки, прошедшие через
фазу S, могут пройти и через митоз. Ингибирование синтеза клеточной ДНК- это вероятно, вторичное
следствие прекращение синтеза белка, так как синтез ДНК идет лишь в том случае, если одновременно
продолжается синтез белка.
Интерферон Рассматривая здесь интерферон только как белок, синтезируемый клеткой в ответ на
вирусную инфекцию и придающий устойчивость к инфекции другим клеткам, это значило бы игнорировать
историю открытия интерферона и связь его с давно известным явлением интерференции вирусов.
Уже давно было известно, что животное часто приобретает защиту от вирулентного действия одного
вируса в результате одновременного или предшествующего заражения менее вирулентным штаммом того же
вируса или каким-либо другим, неродственным вирусом. Впервые это явление было подвергнуто
количественному анализу при изучении тормозящего действия ненейротропных штаммов вируса гриппа на
размножение нейратропного штамма. Такое действие оказывает не только живой вирус: образование
инфекционного вируса гриппа в куриных эмбрионах вирусом гриппа, облученным ультрафиолетом.
Айзекс и Линдеман обнаружили, что аллантоисная жидкость куриных эмбрионов, в которые был
введен облученный вирус, тоже обладает интерферирующей активностью. Вещество, ответственное за эту
активность, было названо интерфероном. Оно блокирует репродукцию самых различных РНК- и ДНК-
вирусов как в куриных эмбрионах, так и в культурах клеток. Интерферон образуется и в организме многих
животных. Это также синтезирует in vitro клетки самых различных типов, как нормальные, так и
злокачественные, хотя и в весьма разных количествах. Особенно хорошими продуцентами интерферона
могут служить клетки Lмыши и специально выведенная линия фибробластов человека. Большие количества
интерферона вырабатывают также циркулирующее в крови лейкоциты. Наконец, некоторые ткани, по-
видимому, накапливают интерферон, так как введение в организм различных неспецифических токсичных
веществ, например бактериального эндотоксина, быстро приводит к появлению в сыворотке крови больших
количеств вещества, тормозящего размножение вирусов — скорее всего интерферона.
Одно время полагали, что интерфероны строго водоспецифичны, однако это неверно. Например,
интерфероны человека и обезьяны защищают от вирусов как клетки человека, так и клетки обезьян, позднее
было обнаружено, что это относится и к интерферонам более далеких друг от друга видов, например
человека и различных грызунов. Однако эффективность гетерологичных интерферонов сильно варьирует.
Степень защиты того или иного вируса определяется типом клеток, а не интерферона. Интерферон
человека защищает клетки человека от вируса везикулярного стоматита лучше, чем от вируса леса Семлики, и
такое же соотношение наблюдается при защите клеток человека интерфероном обезьяны. Напротив, клетки
обезьяны получают большую защиту от второго из этих вирусов, чем от первого, независимо от того, какой
из двух интерферонов к ним добавляют.
Интерферон — очень активный белок. Человеческий интерферон уже в концентрации 10-11 М
препятствует размножению вируса везикулярного стоматита в фибробластах человека. Для сравнения
напомним, что полипептидные гормоны, например инсулин, глюкагон и другие, физиологически активны в
концентрациях от 5х10-10 до 1х10-8 М.
Даже без полной очистки интерферона можно продемонстрировать его гетерогенность. Интерфероны,
продуцируемые клетками одного вида, например человека, могут защищать от вирусов клетки других, весьма
отдаленных видов, например кролика. Стюарт и Десмайтер определили молекулярный вес интерферона
человеческих лейкоцитов, защищавшего от вирусов клетки как человека, так и кролика. В неочищенных
препаратах они обнаружили два вида активных молекул с мол. Весами около 21000 и 15000 соответственно.
Активность меньше молекул в отношении клеток человека оказалась в 20 раз большей, чем в отношении
клеток кролика, тогда как более крупные молекулы были в обоих случаях одинаково активны. Кроме того,
интерферон с мол. Весом 15000 полностью инактивировался под действием В-меркаптоэтанола, который
разрывает дисульфидные мостики, а активность интерферона с мол. Весом 21000 не изменялась. Таким
образом многие клетки (если не большинство их) продуцируют два вида полипептидов, обладающих
активностью интерферона. Индукция синтеза интерферона и индукция интерфероном «противовирусного»
состояния клетки — два тесно связанных между собой, но, вероятно различных явления. Клетки,
приобретающие устойчивость к вирусам, могут продуцировать интерферон. Однако за устойчивость клеток
почти наверняка ответствен не сам интерферон, а какой-то другой белок, ибо от момента добавления
интерферона до полного развития у них устойчивости к вирусам проходит много часов, и после этого клетки
могут и не продуцировать обнаружимых количеств интерферона. Тем не менее добавление вируса к клеткам,
защищенным с помощью интерферона, может привести к дополнительной выработке интерферона этими
клетками.
Индукция интерфероном устойчивости клеток к вирусам Клетки в культуре in vitro, в которых синтез
интерферона индуцирован убитым вирусом или полинуклеотидами, также становятся устойчивыми к
вирусам. Кроме того, многие клетки, подвергшиеся воздействию интерферона, при заражении их вирусом
вырабатывают очень большие добавочные количества этого вещества. Однако некоторые клетки обезьян хотя
и становятся устойчивыми к вирусам после воздействия интерферона обезьяны, не могут вырабатывать
обнаружимых количеств интерферона и не приобретают устойчивости к вирусам после воздействия poly (е)
poly (с) и других двухцепочечных РНК. Кроме того, клетки этой линии в отличие от большинства других
почечных клеток обезьян после заражения их вирусом краснухи не становятся устойчивыми по многим
другим вирусам. Показано также, что в тех случаях, когда индукция интерферона при помощи poly(е) poly (с)
сочетается с добавлением к культуре анти-интерфероновых антител, клетки не становятся устойчивыми к
вирусной инфекции.
Все этим данные позволяют предполагать, что для создания устойчивости к вирусам нужно, чтобы на
поверхности клетки оказались небольшие количества интерферона. Возможно, что при индукции
устойчивости с помощью poly (е) poly (с) вначале образуется интерферон, а затем уже этот интерферон
индуцирует состояние устойчивости. Однако после того как это состояние полностью сформировалось,
образования клетками интерферона обнаружить не удается и если не прибавляют снова интерферон,
устойчивость исчезает. Результаты ряда других экспериментов также подкрепляют гипотезу о том, что
интерферон индуцирует устойчивость клеток к вирусам, взаимодействуя с клеточной мембраной.
Молекулярная основа устойчивости клеток к вирусам Хотя устойчивость, индуциорованная
интерфероном, защищает клетки от самых различных ДНК РНК-вирусов, степень защиты от разных вирусов
неодинакова. Кроме того, для достижения сходной степени защиты клеток одной и той же культуры от
различных вирусов нужны различные количества интерферона. Миксовирусы, тогавирусы и вирус
осповакцины, у которых имеется оболочка, содержащая липиды, более чувствительны к действию
интерферона, чем аденовирусы и энтеровирусы. Однако ряд вирусов, обладающих оболочкой, в том числе
вирусы герпеса и ньюкаслской болезни, более устойчивы к интерферону. Наиболее устойчивы мелкие РНК-
содержание икосаэдрические вирусы. Интерферон блокирует вирусную инфекцию после адсорбции вируса и
проникновения его в клетку. Поскольку интерферон может подавлять репликацию как РНК-, так и ДНК-
содержащих вирусов, логично предположить, что он ингибирует трансляцию вирусных м РНК на рибосомах
клетки — процесс, общий для всех вирусов. Такого рода эффект мог бы реализоваться при участии
противовирусного белка, способного отличать клеточные м РНК от вирусных. Однако при изучении синтеза
белка в экстрактах клеток, обработанных интерфероном, не было получено убедительных данных о том, что
такие системы нормально транслируют клеточные м РНК, но не транслируют вирусных м РНК. Таким
образом, несмотря на привлекательность простейшей гипотезы, объясняющей действие интерферона
избирательным подавлением трансляции вирусных м РНК, нужно признать, что ни один простой механизм
не согласуется со всеми известными данными об устойчивости клеток к вирусной инфекции.
В клетках, подвергшихся действию интерферона, а затем зараженных вирусом осповакцины, синтез
«ранних» м РНК вирионной ДНК-зависимой РНК-полимеразой не подавляется, но эти м РНК не
транслируются и синтеза ранних вирусных белков не происходит. При заражении клеток реови
На сайте Все о медицине собраны материалы для абитуриентов, студентов-медиков,
врачей всех специальностей, а также информация о медицинских академиях,
институтах и университетах России и Украины.Наша база постоянно
пополняется. Все разделы доступны без регистрации. Но после авторизации у
вас будет больше возможностей.Смотрите раздел наши книги, выбирайте каталог - более трех тысяч книг по очень низкой цене
все для Вас!
Также на сайте Вы найдете материалы из следующих разделов медицины : Акушерство,Аллергология,Ангиология,Андрология,Алгология,
Анестезиология,Бальнеолечение,Биомедицина,Гастроэнтерология,
Гематология,Геронтология,Гигиена,Гинекология,Дерматология,Венерология,
Вирусология,Вертебрология,Внутренние болезни,Иммунология,Инфекционные болезни,
Кардиология,Кардиохирургия,Колопроктология,Курортология,
Массаж,Микробиология,Наркология,Неврология,Нейрохирургия,Неонатология,
Нефрология,Онкология,Онкогематология,Ортопедия,Оториноларингология,Офтальмология,
Паразитология,Патологическая анатомия,Педиатрия,Психиатрия,Психология,Пульмонология,
Радиология,Реаниматология,
Ревматология,Рентгенология,Сексология,Сексопатология,Сомнология,
Социальная медицина и организация здравоохранения,Стоматология и челюстно-лицевая хирургия,
Судебная медицина,Терапия,Токсикология и радиология,Травматология,Урология,Фармакология,Физиотерапия,
Фтизиатрия,
Хирургия,Эндокринология,Эндоскопия,Эпидемиология,Эметология,Ядерная медицина
Cлучайное видео:
