В России используется двойное обозначение групп крови — 0(I), А(II), В(III) и AB(IV).
Принадлежность человека к той или иной группе крови не зависит от
возраста, пола, расовой принадлежности. Группа крови передается по
наследству в соответствии с законами генетики. Она является
индивидуальной биологической особенностью человека, которая определяется
уже в раннем периоде эмбрионального развития и не изменяется в течение
всей последующей жизни.
Группа крови — это определенное сочетание врожденных
антигенных свойств эритроцитов (групповых факторов), содержащихся в
клетках крови, и антител к ним, находящихся в плазме (сыворотке).
Вещества, находящиеся в клетках крови, представляют собой антигены
(агглютиногены), вызывающие их агглютинацию (склеивание) при встрече и
взаимодействии с одноименными антителами, получившими название
агглютининов. Агглютиногены клеток крови обозначаются латинскими буквами
А и В, агглютинины — соответственно греческими буквами α и β. Это нашло
отражение в буквенном обозначении групп крови.
Кровь любого человека может одновременно содержать только
противоположные агглютиногены и агглютинины или не иметь каких-то из
них. В противном случае должна произойти агглютинация клеток крови.
В зависимости от сочетания агглютиногенов и агглютининов различают
четыре группы крови по системе АВ0 — основной и наиболее важной
антигенной системе клеток крови человека.
В крови I группы имеется так называемый «нулевой» (0)
агглютиноген, агглютиногены А и В отсутствуют. Соответственно в плазме
(сыворотке) находятся оба агглютинина — α и β. Полная формула крови I
группы — 0αβ(I).
В крови II группы имеются агглютиноген А и противоположный ему агглютинин β. Полная формула II группы крови — Аβ(II).
В крови III группы имеются агглютиноген В и противоположный ему агглютинин α. Полная формула III группы крови — Вα(III).
В крови четвертой группы имеются оба агглютиногена — А и В и отсутствуют агглютинины. Полная формула IV группы крови — AB0(IV).
У 88 % людей с группой крови А(II) определяется разновидность
агглютиногена А — А1, а у 12% имеется агглютиноген А2. Они отличаются
друг от друга по силе агглютиногенной способности. Значительно сильнее
она выражена у разновидности А1. Соответственно, и группа крови AB(IV)
также имеет две подгруппы: A1B(IV) и A2B(IV). Разделение на подгруппы
имеет большое практическое значение при определении группы крови. Не
зная этого, можно ошибочно определить группу крови 0(I) вместо А(II) и
В(III) вместо AB(IV). Это связано с тем, что при наличии слабого
агглютиногена А2 агглютинация при определении группы крови наступает
поздно (иногда через 8—10 мин) и выражена очень слабо.
Определение группы крови стандартными изогемагглютинирующими
сыворотками. Используются любые белые пластинки (тарелки, пластик) со
смачиваемой поверхностью или специальные планшеты. Пластинка маркируется
надписью: слева — 0αβ, в центре — Аβ, справа — Вα. На верхнем крае
пишется фамилия и инициалы человека, у которого определяется группа
крови. Под соответствующим обозначением группы крови на пластинку
наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартной сыворотки
соответствующей группы.
При использовании сывороток с титром не ниже 1:64 разрешается для
первичного определения группы крови использовать одну серию каждой
группы. При наличии сывороток с меньшим титром используются две серии
сывороток каждой группы. Для каждой ампулы сыворотки выделяется
отдельная маркированная пипетка, которая после нанесения сыворотки на
пластинку сразу же опускается в ту ампулу с сывороткой, из которой была
взята.
Кровь для исследования может быть взята из пальца, вены, взвеси
эритроцитов, со дна пробирки. Капля крови должна быть примерно в 10 раз
меньше капли стандартной сыворотки (соотношение 1:10), с которой она
смешивается сухой стеклянной палочкой. Можно пользоваться одной палочкой
с оплавленным гладким концом, промывая ее после размешивания каждой
капли в стакане с физиологическим раствором и вытирая насухо.
После размешивания капель в равномерно красный цвет пластинку
покачивают, оставляют на 1 —2 мин в покое, а затем снова периодически
покачивают.
Не ранее чем через 3 мин в капли, в которых наступила агглютинация,
добавляют по 1 капле (0,05 мл) физиологического раствора NaCl.
Хотя
агглютинация начинается в течение первых 10 — 30 с, наблюдение следует
продолжать до 5 мин, после чего делается заключение о группе крови.
Реакция гемагглютинации может быть положительной или отрицательной.
Положительной реакцией считается наличие агглютинации, отрицательной —
ее отсутствие.
При использовании двух серий сывороток результаты в каплях с сывороткой
одной и той же группы должны совпадать. Результаты определений могут
дать четыре различные комбинации положительных и отрицательных реакций:
1) если сыворотки всех трех групп дали отрицательную реакцию, то исследуемая кровь принадлежит к группе 0(I);
2) если сыворотки групп 0αβ и Вα дали положительную реакцию, то
кровь принадлежит к группе А(II);
3) если сыворотки групп 0αβ и Аβ дали положительную реакцию, а
сыворотка группы Вα — отрицательную, то исследуемая кровь принадлежит к
группе В(III);
4) если сыворотки всех трех групп дали положительную реакцию, для
исключения неспецифической агглютинации необходимо провести
дополнительное исследование с сывороткой АВ0. Если Реакция с этой
сывороткой также будет отрицательная, то исследуемая кровь относится к
группе AB(IV).
Оценка результатов определения групп крови при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток приведена в таблице:
Оценка результатов определения групп крови при помощи изогемагглютинирующих сывороток
Определение группы крови с помощью моноклональных антител (цоликлонов).
Используются стандартные наборы моноклональных антител высокой специфичности, содержащие реагенты анти-А, анти-В и анти-АВ.
На маркированную пластинку раскапываются в три точки исследуемые эритроциты (0,01—0,03 мл). Рядом с ними помещают реагенты анти-А, анти-В и анти-АВ по одной капле (0,1 мл) в соотношении 1 : 5... 1 : 6. Капли перемешивают стеклянной палочкой, пластинку периодически покачивают, ход реакции наблюдают в течение 3 мин.
Оценка результата проводится по наличию агглютинации эритроцитов с соответствующим реагентом.
При агглютинации во всех трех каплях определяется группа крови AB(IV). При агглютинации с анти-А и анти-АВ определяется группа крови А(II). При агглютинации с анти-В и анти-АВ определяется группа крови В(III). При отсутствии агглютинации во всех трех каплях определяется группа крови 0(I).
Оценка результатов определения групп крови при помощи цоликлонов приведена в таблице:
Знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) ее отсутствие.
При наличии агглютинации со всеми тремя реагентами необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого к капле эритроцитов вместо цоликлонов добавляют каплю физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.
